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Browsing by Author "Toro, Rubén Darío"

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  • Plasmidotipia y evaluación in vitro de la virulencia de cepas de Salmonella enteritidis de origen aviar

    Institución: Universidad de Antioquia

    Revista: Iatreia

    Autores: Suárez, Cecilia; Mantilla Anaya, José Ramón; Toro, Rubén Darío

    Fecha de publicación en la Revista: 2000-02-25

    Fecha de cosecha en Ciencia Nacional: 2024-07-01

    Con el fin de caracterizar a nivel biológico y molecular cepas de Salmonella entérica, subespecie entérica serotipo Enteritidis (Salmonella enteritidis) se obtuvieron y confirmaron bioquímica y serológicamente treinta cepas aisladas de aves clínicamente sanas. Las cepas fueron evaluadas mediante plasmidotipia y determinación de virulencia in vitro evaluando susceptibilidad antimicrobiana, actividad hemaglutinante manosa resistente y manosa sensible como indicativo de la presencia de adhesinas fimbriales y capacidad de sobrevivencia en el interior de macrófagos. La extracción de plásmidos se realizó por la técnica de lisis alcalina. Se obtuvieron perfiles de restricción con las enzimas PstI y SmaI. La susceptibilidad antimicrobiana se determinó por la prueba de difusión de disco en agar. La actividad hemaglutinante en presencia y en ausencia de manosa fue evaluada frente a glóbulos rojos de ave, bovino, equino, humano (A+) y ovino. La capacidad de sobrevivencia en el interior de macrófagos se determinó valorando la viabilidad de las cepas 24 horas después de la ingestión por macrófagos de línea de origen murino. Veintinueve cepas (96.6%) mostraron un plasmido cuyo tamaño corresponde al plasmido de virulencia asociado a serotipo. Veintisiete cepas (90%) mostraron dos o más plasmidos. Perfiles de restricción realizados con las enzimas Pst I y Sma I permitieron establecer una alta asociación entre las cepas. Se determinó resistencia a uno o más antimicrobianos en catorce cepas de S. enteritidis (46.6%), se observó resistencia a oxitetraciclina, sulfatrimetroprim, estreptomicina y cloranfenicol. Ninguna cepa mostró resistencia a gentamicina y kanamicina. Se detectó actividad hemaglutinante manosa sensible como indicativo de adhesinas fimbriales tipo I en once cepas (36.6%) de las treinta evaluadas. La totalidad de las cepas sobrevivieron en el interior de macrófagos de línea J774A.1 y fueron viables 24 horas después de la ingestión. Con base en los resultados de este estudio se verificó la virulencia de cepas de Salmonella enteritidis de origen aviar, confirmando esta especie como fuente potencial de infección para humanos. La plasmidotipia, la susceptibilidad antimicrobiana, la detección de hemaglutininas y la sobrevivencia de las cepas en el interior de macrófagos permitieron caracterizar las cepas de campo y pueden constituirse en herramientas útiles para estudios biológicas y en combinación con otras técnicas moleculares y fenotípicas pueden contribuir a estudios epidemiológicos, dada la importancia en salud humana y animal de este patógeno.
  • Rapid Purification Immunoglobulin M From Serum of White Cachama () and Preparation of a Rabbit Polyclonal Antiserum.

    Institución: Universidad Nacional Abierta y a Distancia

    Revista: Nova

    Autores: Montoya, Francy J.; Almanza M. MSC, Jorge E.; Parada, Sandra; Eslava, Pedro René; Arias, Alfredo; Toro, Rubén Darío; Rojas, Joyce Andrea

    Fecha de publicación en la Revista: 2007-12-15

    Fecha de cosecha en Ciencia Nacional: 2024-04-30

    In spite of the recognized rusticity of the cachama, the increasing tendency towards the intensification of the production systems of the species, begins to favor the increase of sanitary problems, which will have to be characterized in order to be able to establish methods of diagnosis and rational plans of prevention. Since the knowledge of ictiopathology of native species is incipient, among other things because of the little availability of information on basic aspects of histology, embryology, physiology, anatomopathology, immunology and epidemiology,  the establishment of investigation projects that allow to know such aspects in order to support the production of these species technically becomes necessary. With this work begins the acquisition of knowledge about the basic immunologic aspects of the White Cachama (Piaractus brachypomus).For this end, gamma-globulins were purified by means of the elution starting from agarosa gels. The presence of two possible attachés of IgM was confirmed. One of them seems to correspond to form monomerics and the dependability of this purification method allows us to obtain small quantities of protein without the presence of pollutants. The reactivity of the obtained antiserum only reacted against the fraction of the gamma-globulins, what was proven by means of the inmunoelectroforesis technique with the serums of White Cachama. Also, they obtained two bands with SDS - PAGE under conditions without reduction; the first one with an approximate weight of 80 kDa and the second one about 70 kDa. Under reduced conditions, two bands were obtained, the first one with an approximate weight of 90 kDa and the second of 70 kDa.
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