Introducción: Los quirófanos y las diferentes zonas críticas de una institución hospitalaria son áreas de ambiente controlado, cuyo propósito es proteger al paciente de posibles infecciones nosocomiales, provenientes de microorganismos patógenos presentes en el aire que circula dentro del área quirúrgica, ya que este es el principal factor para reducir la presencia de partículas capaces de dispersarse vía aérea. La exposición a estos patógenos potenciales debe ser controlada, y para ello es necesario evaluar la composición y concentración de microorganismos aéreos en clínicas y hospitales. Metodología: El estudio es observacional-descriptivo-transversal; la población beneficiada es una clínica ortopédica de la ciudad de Pereira, Colombia, utilizando para la toma de muestras el método volumétrico por impacto y aspiración, con un volumen de 500 litros de aire en cada toma, donde se analizó la presencia de aerobios, mesófilos, mohos y levaduras. Resultados: Después de realizada la toma de muestras, se evidenció la presencia de los microorganismos anteriormente mencionados, ajustados dentro del límite permitido, teniendo en cuenta las ‘Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica’. Conclusiones: No existe un consenso internacional sobre el número de mediciones y la forma de hacer los cultivos, y tampoco se ha demostrado una correlación entre los niveles detectados y la presencia de infecciones.